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猫头鹰是森林中的捕鼠专家 ， 主要以黑线姬鼠、黑线仓鼠、大仓鼠、棕色田鼠等农田鼠类和小家鼠、褐家鼠等居民区鼠类为主食 。除了吃鼠类的动物 ， 也吃一些小型鸟类、哺乳类和昆虫 ， 比如雀类、莺类、蝙蝠、甲虫、金龟子、蝗虫、蝼蛄等 。
猫头鹰绝大多数是夜行性动物 ， 昼伏夜出 ， 白天隐匿于树丛岩穴或屋檐中不易见到 ， 但也有部分种类如斑头鸺鹠、纵纹腹小鸮和雕鸮等白天亦不安寂寞 ， 常外出活动；一贯夜行的种类 ， 一旦在白天活动 ， 常飞行颠簸不定犹如醉酒 。
猫头鹰一旦判断出猎物的方位 ， 便迅速出击 。猫头鹰的羽毛非常柔软 ， 翅膀羽毛上有天鹅绒般密生的羽绒 ， 因而猫头鹰飞行时产生的声波频率小于1千赫 ， 而一般哺乳动物耳朵是感觉不到那么低的频率的 。
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